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    ELISA的应用与操作注意事项

    点击次数:994  更新时间:2015-11-04

    ELISA的应用

        ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面:

    1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。

    2、研究抗酶抗体的合成。

    3、显现微量的免疫沉淀反应。

    4、定量检测体液中抗原或成份。

    ELISA操作注意事项

    1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

    2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

    3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

    4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

    5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

    6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
    于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

    7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露

    8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

    9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

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