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    免疫组化ABC法实验步骤

    点击次数:1454  更新时间:2015-11-06

    1、4%多聚甲醛常规灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃),蜡块制作,切片,贴片。0.01M PBS清洗5min×3次;

    2、脱蜡、水化:用二甲苯两次10min,用梯度乙醇由低浓度到高浓度进行水化;

    3、加入0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01M PBS 100ml+30%过氧化氢)30min,以消除内源性过氧化物酶的影响,0.01M PBS清洗5min×3次;

    4、加入0.3% Triton X-100(0.3ml Triton X-100+0.01 M PBS 100ml)30min,以增加细胞的通透性,0.01M PBS清洗5min×3次;

    5、加入用血清稀释液(牛血清白蛋白1.00g+0.01M PBS 100ml+叠氮纳0.08g)稀释的一抗,4℃存放24-48h。吸去,0.01M PBS洗5min×3次;

    6、加入0.01M PBS稀释的的二抗,室温孵育2h。0.01M PBS洗5min×3次;

    7、加入ABC复合物之类的抗体,室温孵育2h,0.01M PBS洗5min×3次;蒸馏水迅速冲三次;

    8、加入显色液,进行免疫组织化学显色,时间一般3~10min,可不时在显微镜下进行观察,待细胞着色而背底颜色较淡时马上吸去显色液,用蒸馏水迅速冲三次后加入0.01M PBS终止反应;

    9、苏木素复染;

    10、梯度酒精脱水之后,透明,封片,拍照。

    Harpagoside 哈巴俄甙;哈巴脂苷 *: 哈巴俄苷 规格: 19210-12-9 20mg/支
    Harpagide 哈帕苷; 哈帕甙; 瓜钩草苷 *: 哈巴苷 规格: 1835927 20mg/支
    Angoroside C 安格洛苷C *: 安格洛甙C 规格: 115909-22-3 20mg/支
    10-Deacetylbaccatin III 10-脱巴卡丁Ⅲ *: 10-脱乙酰巴卡亭 规格: 32981-86-5 20mg/支
    Timosaponin BII 知母皂苷B2 *: 知母皂苷BII 规格: 136656-07-0 20mg/支
    Timosaponin A3 知母皂苷AⅢ; 知母皂苷A-III *: 知母皂苷A3 规格: 41059-79-4 20mg/支
    Byakangelicin 比克白芷内酯; 比克白芷素 *: 白当归素 规格: 19573-01-4 20mg/支
    Corynoxeine 柯诺辛因碱 *: 去氢钩藤碱 规格: 630-94-4 20mg/支
    Isocorynoxeine 异柯诺辛因碱 *: 异去氢钩藤碱 规格: 51014-29-0 20mg/支
    Ophiopogonin D *: 麦冬皂苷D 规格: 41753-55-3;945619-74-9;11054-29-8;11088-12-3 20mg/支
    Brazilin *: 巴西苏木素 规格: 474-07-7 10mg/支
    Tenuifolin 细叶远志皂甙 *: 细叶远志皂苷 规格: 20183-47-5 20mg/支
    Scopolamine butylbromide 丁溴东莨菪碱; 溴丁东莨菪碱 *: 丁溴酸东莨菪碱 规格: 149-64-4 20mg/支

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