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    ELISA常见15个问题

    点击次数:802  更新时间:2015-11-25

    1. 产品有哪几种规格?可检测多少个样本?

        产品分为48T和96T两种规格。

        每次实验的标准曲线一般设254个不同浓度,加上空白孔,标准曲线一共需要4946个孔。因此,一个48T试剂盒zui多可以测定913个样本(不做重复且一次用完),一个96T试剂盒zui多可以测定84946个样本(不做重复且一次用完)。可以根据实际样本数量和实验计划选择合适的产品规格。

    2.48T和96T的试剂盒有哪些不同?

        48T和96T的试剂盒,每个孔的反应体系都是*一样的。不同的是试剂盒中各组分的规格,详见说明书。

    3. 产品的稳定性如何?

        产品在前期已通过严格的稳定测试,发货前亦须通过检测并提供质检报告,在市场上深受广大客户的赞许!

    4.贵公司有没有酶活性检测的试剂盒?

        酶活力的测定实际上就是测定酶促反应的速率。酶活力的大小即酶含量的多少,可以用每克酶制剂或每毫升酶制剂含有多少酶单位来表示,单位是U/g或U/ml。酶活力的测定方法:⑴测定完成一定量反应所需的时间,⑵测定单位时间内酶催化化学反应量。主要通过产物的增加量或底物的减少量来测定。常用的方法有:⑴分光光度法,⑵荧光法,⑶同位素测定法,⑷电化学法。

        ELISA的方法一般是对可溶性抗原或抗体进行定性和定量的检测,所以酶活性是不能用ELISA来检测的。

    5.一次ELISA实验需要多长时间?

        双抗体夹心ELISA法一次实验需要4-4.5小时,竞争ELISA法一次实验需要2-2.5小时。

    6.血清样本如何处理?

        全血标本于室温放置2小时或4℃过后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

    7. 血浆样本如何处理?

        应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,于1000×g离心15分钟,仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

    8. 尿液样本如何处理?

        用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

    9.细胞上清液样本如何处理?

        检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(1000×g)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心10分钟左右(5000×g)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

    10.   组织样本如何处理?

        用预冷的PBS (0.01M,pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。

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