1)无菌操作室的注意事项
①严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。
②无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10 000级，室内温度保 持在20—24℃，湿度保持在45％～60％。超净台洁净度应达到100级。
③无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。严防一切灭菌器材和培养基污染，已污 染的停止使用。
④无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。
⑤需要带人无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，应包扎严密，并应经过适宜的方 法灭菌。
⑥工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换工作 服、鞋、帽子、口罩和手套(或用75％乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。
⑦无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30 min以上，并且同时打开超净台进 行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20 min。
⑧已灭菌的实验用品在使用前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。实验前，用 75％的酒精棉球消毒外表面。
⑨凡带有活菌的物品，须经消毒灭菌后，才能在水下冲洗，严禁污染下水道。
2)实验过程中的注意事项
①开包后的无菌包和开封后的无菌溶液有效期均为24 h，无菌盘有效期限不超过4 h。
②使用无菌持物钳时不可触及容器口边缘及溶液以上的容器内壁。使用时应保持钳端向下，不可倒转向上，用后立即放入容器中。如到远处夹取物品时，无菌持物钳应连同容器并搬移，就地取出使用。无菌持物钳只能用于夹取无菌物品。无菌持物钳及其浸泡消毒容器，应每周清洁消毒2次，并更换消毒溶液。
③使用无菌瓶内的溶液时，不可将无菌敷料堵塞瓶口倾倒无菌溶液，或直接伸人溶液瓶内蘸取，以免污染剩余的溶液。
④无菌包内物品不慎污染或无菌包浸湿时，外界微生物可渗入包内，造成污染，因而需重新消毒。
⑤戴手套时应注意未戴手套的手不可触及手套外面，而戴手套的手则不可触及未戴手套的手或另一手套的里面。戴手套后如发现破裂，应立即更换。脱手套时，须将手套口翻转胶下．不可用力强拉手套边缘或手指部分，以免损坏。
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