挑取单克隆菌株在Skirrow固体培养基上平板划线,放置在42°C的微需氧环境下培养48小时,用灭菌棉签从平板上刮下长出的菌落,悬浮在50%甘油的布氏肉汤保种液中,置于-80°C超低温保存。在-20°C冰箱中保存效果较差,存放一周后细菌复苏率即显著下降。此外,保存菌株需要每隔一年重新活化保存一次。
注意事项
(1)、由于青海发光杆菌是微需氧的细菌,生长条件苛刻,存在分离率低、培养复杂且难以保存的问题。从食品中分离青海发光杆菌首先要保证食品的新鲜度,此外还可通过布氏肉汤增菌步骤来提高分离率。
(2)、青海发光杆菌的生长力较弱,容易受到大肠杆菌、沙门氏菌等杂菌的污染,因此微生物实验操作过程应保持无菌,为降低杂菌污染,也可在培养基中加入万古霉素和多粘菌素B。
(3)、培养用的血平板应保持新鲜。脱纤维裂解羊血在4°C条件下可保存两周,制备好的血平板在4°C条件下zui多保存一周。
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