收货处理取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数可传5代左右;3代以内状态最佳
传代比例传代建议1:2传代,1:2传代就是3189个T25瓶传870个T25瓶或者870个6cm皿。不是3189个T25瓶传870个10cm皿
传代方法
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4.待细胞贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。
产品名称 | 小鼠主动脉瓣膜间质细胞 | 货号 | EY-XY3768 |
英文名称 | 详见说明 | 规格 | 5x105cells/T25或1mL冻存管 |
质量检测:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)或波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色为阳性,纯度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
产品规格:5x105cells/T25或1mL冻存管
培养基:小鼠主动脉瓣膜间质细胞培养基
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
换液频率:每2-3天换液一次
消化液:0.25%
产品货期现货,1周左右
运输方式T25培养瓶/ 顺丰快递(包邮)
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
主动脉瓣施半月瓣,位于左心室和主动脉之间,抑制射入主动脉的血液回流入左心室。主动脉瓣钙化可引起主动脉瓣狭窄关闭不全等,施导致老年退行性心瓣膜病的重要病理改变,其发病率随着年龄的增加而升高。有研究表明,瓣膜间质细胞向城固细胞样细胞表型转化有可能是主动脉瓣膜钙化的病理改变基础之一。 |
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
锌指蛋白85抗体
组织半-1(CASPASE-1)活性荧光定量检测试剂盒
GST融合蛋白阳性表达树脂电泳筛选试剂盒
体液科萨基病毒A(Coxsackievirus A)定量PCR扩增检测试剂盒
细胞RHO 蛋白表达比色法定量检测试剂盒
转基因油菜(canola)HCN92品系基因检测试剂盒
PEPCIN酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒
组织磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)活性
植物培养细胞DNA损伤彗星荧光检测试剂盒
冰冻切片琥珀酸脱氢酶活性染色试剂盒
通用性前列E2(PGE2)高效液相色谱法紫外定量检测试剂盒
MFN-1(MITOFUSIN) 蛋白表达检测试剂盒
组织砷元素比色法定量检测试剂盒
细胞CYP1A2蛋白表达荧光定量检测试剂盒
体液基质金属(MMP-9)活性荧光定量检测试剂盒
BrdU标记法细胞繁殖流式细胞仪检测试剂盒
增殖细胞核抗原(内参)单克隆抗体
甘丙肽受体拮抗剂抗体
趋化因子受体D6抗体
KCTD6蛋白抗体
细胞角蛋白14t重组兔单克隆抗体
ZMYND19蛋白抗体
跨膜受体蛋白Notch-3单克隆抗体
小鼠主动脉瓣膜间质细胞A-Raf抗体
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