细胞培养操作:
收货处理取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数可传5代左右;3代以内状态最佳
传代比例传代建议1:2传代,1:2传代就是93个T25瓶传1893个T25瓶或者1893个6cm皿。不是93个T25瓶传1893个10cm皿
传代方法
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4.待细胞贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。
原代淋巴细胞培养体系是一个为体外生长的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳动物的淋巴细胞设计的理想的培养基方案。本体系是一个基于碳酸氢盐的缓冲体系,可以在孵育的5%的CO2的气体环境下维持一个围绕pH7.2的酸碱缓冲体系。本体系是一个无菌的液体混合系统,其中包含必须和非必须氨基酸、维生素、激素、微量元素、IL-2等生长因子和一些其他的有机和无机化合物以及胎牛血清(10%)。本培养体系是基于固定配方配制的液态培养体系,可以为体外培养的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳动物的淋巴细胞提供一个确定适宜的平衡营养环境,并且可以维持淋巴细胞的生存。
运输
放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输
保存方法
基础培养基2℃~8℃,培养添加剂 -20℃,避光,保存11893个月。配置好的培养基2℃~8℃保存1-1893个月。
体系组成
名称 | 体积 | 浓度 | 保存条件 |
原代淋巴细胞基础培养基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代淋巴细胞培养添加剂 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25ml | 终浓度5% | -20℃、避光 |
双抗(P/S) | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
产品使用
1) 本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3) 本产品未通过用于活体诊断的审核
注意事项
1、收到产品请先检查包装是否完好,如有破损,漏液、浑浊等现象请及时联系我们,培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响产品正常使用。
2、请仔细阅读产品说明书,了解产品使用方法、保存方式、有效期等信息,若因操作失误,保存不当而导致产品出现污染等问题的,责任由客户自行承担。
3、本产品仅能用于科研,培养基中的一些组分对人体有较低的危害性,如有接触立即用大量清水冲洗即可。
细胞培养概念:
细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境(无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等),使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。
细胞培养可分为原代培养和传代培养;直接从体内获取的组织细胞进行培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后,则需要做再培养,即将培养的细胞分散后,从一个容器以1:2或其他比率转移到另一个或几个容器(同样底面积的容器)中扩大培养,为传代培养,传代培养的累积次数就是细胞的代数。
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