HPDE6-C135人正常胰腺导管上皮细胞

细胞基本属性：

细胞详细介绍：

传代培养操作步骤：

一、贴壁培养

细胞传代培养操作步骤如下：

（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。

（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。

（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的，一般应覆盖整个培养瓶底。

（4）把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化，2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察，当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时，再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，然后立即加入2倍量的培养液中止消化，使用吸头轻轻吹打，混合均匀，以防消化过度。

（5）吸出所有细胞悬液至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。

（6）弃上清，加入适量培养液重悬细胞，轻轻吹打混匀，使细胞均匀分散。

（7）用吸头吸取适量细胞悬液，以适宜的密度接种于新的培养瓶中，补足培养液，摇匀，放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。

（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间，甚至进行细胞冻存。

二、悬浮细胞

传代培养操作步骤如下：

一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法（培养液中含有细胞碎片的情况下）。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%（细胞悬液变黄）时，即可进行传代。

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Glycophorin A： 血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体 滑膜细胞培养基SM

HeLa细胞，人细胞 小鼠T淋巴细胞瘤细胞,Cyc-Tag(S49)细胞 原代平滑肌细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml 人细菌(BV)ELISA 试剂盒 IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗豚鼠IgG 0.1ml

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CM-M122小鼠视网膜神经节细胞培养基100mL 人细胞周期3(Cyclin-D3)ELISA 试剂盒 IgG/AP 碱性0酸酶(AP)标记的兔抗豚鼠IgG 0.1ml

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IL17A Protein Human IL17 / IL17A 蛋白 大鼠前列腺酸性0酸酶(ACP3)ELISA试剂盒 OPN(Mouse Osteopontin)  小鼠骨桥素 96T

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Natrexone： 纳曲酮抗体 3T3-Swiss albino细胞，胚胎成纤维细胞 人胰腺癌细胞,CRL细胞 CM-M048小鼠肠巨噬细胞培养基100mL

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Vero细胞，绿猴肾细胞 RSC96(大鼠雪旺细胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180 犬组胺(HIS)ELISA 试剂盒 HSL(hormone-sensitive lipase) 荷尔蒙敏感脂肪酸(抗原) 0.5mg

IL-20R alpha： 白介素20受体α链抗体 AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人细胞裂解液 (阳性对照)

（1）严格进行无菌操作，所用一切试剂及耗材均应无菌，且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上，以免细胞发生污染。

（2）所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞，对培养液的要求不一样，必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。

（3）胎牛血清对于维持细胞生存，促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定，就应保持用至实验完成。

（4）消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少，或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离，这时的细胞已有损伤或死亡，影响细胞数量和实验进度。

（5）细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够，或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后，应先弹散细胞沉淀，再加入培养液重悬，这样比直接吹打对细胞损伤小，可以提高细胞活率。

（6）吹打细胞时应尽量避免细胞的产生，以免损伤细胞，影响细胞状态（吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生）。