传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
PL45人胰腺导管腺癌细胞
细胞基本属性:
产品名称 | PL45人胰腺导管腺癌细胞(STR鉴定正确) | 组织来源 | 胰腺 |
种属 | 人 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞规格 | 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 PL45,人胰腺导管腺癌细胞 支原体检测 无 培养基 DMEM+10% FBS+PS 培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
HMEpC Pellet 人类上皮细胞团块 > 1 mio.cells 人髓核细胞cDNAHNPC cDNA 人雄(ASD)ELISA 试剂盒 Rabbit Anti-dog IgG/Cy3 Cy3标记的兔抗狗IgG 0.1ml
GALR2: 甘丙肽受体2抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF
EB (NBL-4) (牛胚气管细胞) 5×106cells/瓶×2 人胸腺依赖性抗原(TD-Ag)ELISA 试剂盒 Rabbit Anti-dog IgG/Cy5 Cy5标记的兔抗狗IgG 0.1ml
GALR3: 甘丙肽受体3抗体 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
肌细胞分离液MDS (TP-5)ELISA 试剂盒 Rabbit Anti-dog IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗狗IgG 0.1ml
T24-EGFP(CMV-EGFP慢病毒构建稳定株)人膀胱癌细胞 T24-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) of human bladder cancer cells 1640+10% FBS 大鼠热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 试剂盒 LHRH 大鼠黄体生成素释放激素 96T
phospho-NDEL1(Thr219): 0酸化中心粒蛋白Nudel抗体 RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-R052大鼠子宫平滑肌细胞培养基100mL 大鼠热休克蛋白β8(HSPβ8)ELISA试剂盒 OSMR(human oncostatin M receptor) 人制瘤素M受体 96T
NDUFS4: 线粒体复合物NDUFS4蛋白抗体 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H3
人脑血管平滑肌细胞 (HBVSMC)( 5×105 ) 人脐动脉内皮细胞 MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人癌细胞 大鼠热休克蛋白β6(HSPβ6)ELISA试剂盒 vWF(Mouse von Willebrand Factor) 小鼠血管性血友病因子/瑞斯托辅因子 96T
PL45人胰腺导管腺癌细胞phospho-IKK beta(Ser471): 0酸化KB抑制蛋白激酶β抗体 人成骨肉瘤细胞;MG-63
T84(人结肠腺癌肺转移细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞);YAC-1 人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA 试剂盒 CD117/c-kit/SCFR 干细胞生长因子受体/细胞表面分化抗原(抗原) 0.5mg
phospho-IKK beta(Ser740): 0酸化KB抑制蛋白激酶β抗体 海马神经应细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
CSF1 Protein Mouse 重组小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 标签) 人Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA 试剂盒 CD133 造血干细胞抗原(多肽抗原) 0.5mg
phospho-IKK beta(Ser733): 0酸化KB抑制蛋白激酶β抗体 PTPN12 Others Human 人 PTPN12 (aa 1-355) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
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