传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
Tca-8113人舌鳞癌细胞
细胞基本属性:
产品名称 | Tca-8113人舌鳞癌细胞 | 组织来源 | 舌癌 |
种属 | 人 | 生长特性 | 贴壁生长 |
背景简介 | Tca-8113细胞源自属于I级鳞癌(T2N1Amo,Ⅱ期)的原位舌癌的活组织检查切片。通过干贴壁方法建立于1987年 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞代数 | 10代以内 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 TCA8113; Tca-8113;人舌鳞癌细胞 细胞规格 1x106cells/T25或1mL冻存管 支原体检测 无 培养基 RPMI-1640+20%FBS+1%双抗 培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
FBXL21: FBXL21蛋白抗体 大鼠颗粒细胞(RGC)(1×106)
人成骨肉瘤细胞;Saos-2 兔子生长激素释放多肽(GHRP)ELISA 试剂盒 IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗马IgM 0.1ml
FBXO7: F-box蛋白家族FBXO7抗体 615小鼠癌瘤株;Ca759 小鼠卵巢上皮细胞培养基 100mL
TSPAN8 Others Human 人 TSPAN8 / Teaspanin 8 / TM4SF3 人细胞裂解液 (阳性对照) 兔子肾上腺髓质素(ADM)ELISA 试剂盒 IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗马IgG 0.1ml
FBXO11: F-box蛋白家族FBXO11抗体 SV40T转化的人胚肾细胞;293T
IL1RN Protein Rat 重组大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 标签) 大鼠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA 试剂盒 CACT 大鼠肉毒碱脂酰转移酶 96T
MAdCAM-1: 粘膜血管定居因子抗体 PAK3 Others Human 人 PAK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠视网膜神经节细胞培养基 100mL 大鼠腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA试剂盒 C3a (Rabbit Complement fragment 3a) 兔子补体片断3a 96T
Maspin: 抑癌基因抗体 SMC-1细胞,胸膜细胞瘤 早幼粒急性白血病细胞系,HL-60细胞 小鼠子细胞;U14
HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠腺苷受体A2a(ADORA2A)ELISA试剂盒 LZM(Mouse Lysozyme) 小鼠 96T
Tca-8113人舌鳞癌细胞HCMV UL49: 人巨细胞病毒UL49蛋白抗体 动物上皮细胞生长添加物-aEpiCGS-2-a
PPBP Protein Human 重组人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 标签) 人二0酸腺苷(ADP)ELISA 试剂盒 FSH-R(Follicle-stimulating hormone receptor precursor) 促卵泡刺激素受体抗原 0.5mg
HLA E: 人类白细胞抗原E抗体 NGF Others Mouse 小鼠 β-NGF / Beta-NGF CHO细胞裂解液 (阳性对照)
人甲状腺滤泡上皮细胞培养基 100mL 人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)ELISA 试剂盒 FSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺激素抗原 0.5mg
HECTD3: E3连接酶抑制素受体3抗体 荷兰黑白花奶牛牛肺细胞;DCL1 肺腺癌细胞,SPA-A1细胞 SCaBER(膀胱鳞癌细胞)
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