传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
HPT-8人饲养层上皮细胞
细胞基本属性:
产品名称 | HPT-8人饲养层上皮细胞 | 组织来源 | 表皮 |
种属 | 人 | 生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞规格 | 1x106cells/T25或1mL冻存管 | 冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
细胞详细介绍:
细胞别称 HPT-8;人饲养层上皮细胞 支原体检测 无 培养基 RPMI-1640+10%FBS+1%双抗 培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ 冻存条件无血清冻存液,液氮储 发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递 供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
Flotillin 2: 表皮细胞表面抗原1抗体 人肠平滑肌细胞RNAHISMC miRNA5 μg
GRC-1细胞,人肾癌细胞 鼠纤维肉瘤细胞系,WEHI 164细胞 CL-0446SUP-B15(人Ph+急淋白血病细胞系)5×106cells/瓶×2 兔细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA试剂盒 Goat Anti-Bovine IgG/Gold 胶体金标记的羊抗IgG 0.5ml
Factor IX: 9抗体 EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人细胞裂解液 (阳性对照)
MN-h, 小鼠海马神经元 兔透明质酸(HA)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Bovine IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗IgG 0.1ml
Factor X: 10抗体 H9c2大鼠心肌细胞(ATCC来源) Rattus
TNFSF11 Others Mouse 小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠(Pepsin)ELISA 试剂盒 HL(Mouse hepatic lipase) 小鼠肝脂酶 96T
MTGR1: 髓易位基因相关蛋白1抗体 人少突胶质前体细胞(悬浮生长)cDNAHOPC-os cDNA
L W-3A小鼠皮下结缔组织细胞 L W-3A mice subcutaneous connective tissue cells DMEM培养基+10%FBS 大鼠胃肠癌标志物CA199ELISA 试剂盒 UK 大鼠 96T
BBS6: 巴德-毕德氏综合征蛋白BBS6抗体 HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0282HO-8910PM(人高转移卵巢癌细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠尾加压素II(Urotensin II) ELISA试剂盒 VCAM-1/CD106(Human Vascuolar cell adhesion molecule 1) 人血管内皮细胞粘附分子1 96T
HPT-8人饲养层上皮细胞Phospho-IRAK1 (Thr209): 0酸化白介素-1受体相关激酶1抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0923
NIH/3T3(小鼠胚胎细胞) 5×106cells/瓶×2 人 EVI2A 人细胞裂解液 (阳性对照) 人成骨生长肽(OGP)ELISA 试剂盒 Inhibin beta A peptide 抑制素beta A抗原 0.5mg
Phospho-IRAK1 (Thr387): 0酸化白介素-1受体相关激酶1抗体 小鼠颗粒细胞MGC
CCL1 Protein Human 重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 试剂盒 Inhibin beta B 抑制素βB抗原 0.5mg
IRF3: 干扰素调节因子3 0.1ml
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