传代培养操作步骤：

一、贴壁培养

细胞传代培养操作步骤如下：

（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。

（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。

（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的，一般应覆盖整个培养瓶底。

（4）把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化，2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察，当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时，再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，然后立即加入2倍量的培养液中止消化，使用吸头轻轻吹打，混合均匀，以防消化过度。

（5）吸出所有细胞悬液至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。

（6）弃上清，加入适量培养液重悬细胞，轻轻吹打混匀，使细胞均匀分散。

（7）用吸头吸取适量细胞悬液，以适宜的密度接种于新的培养瓶中，补足培养液，摇匀，放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。

（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间，甚至进行细胞冻存。

HNEPC人鼻粘膜上皮细胞

细胞基本属性：

细胞详细介绍：

二、悬浮细胞

传代培养操作步骤如下：

一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法（培养液中含有细胞碎片的情况下）。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%（细胞悬液变黄）时，即可进行传代。

（1）严格进行无菌操作，所用一切试剂及耗材均应无菌，且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上，以免细胞发生污染。

（2）所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞，对培养液的要求不一样，必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。

（3）胎牛血清对于维持细胞生存，促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定，就应保持用至实验完成。

（4）消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少，或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离，这时的细胞已有损伤或死亡，影响细胞数量和实验进度。

（5）细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够，或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后，应先弹散细胞沉淀，再加入培养液重悬，这样比直接吹打对细胞损伤小，可以提高细胞活率。

（6）吹打细胞时应尽量避免细胞的产生，以免损伤细胞，影响细胞状态（吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生）。

公司正在出售的产品：

SELPLG Others Human 人 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人细胞裂解液 (阳性对照) 兔基质金属蛋白9(MMP-9)ELISA试剂盒 Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗大鼠IgG 0.1ml

phospho-FXYD1 (Ser83)： 0酸化0酸神经膜抗体 人脑血管平滑肌细胞RNAHBCSMC miRNA5 μg

EJ细胞，人膀胱癌细胞 小鼠成纤维细胞系,McCoy细胞 人少突胶质细胞 兔肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 试剂盒 Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗大鼠IgG 0.1ml

Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463)： 0酸化碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体 TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人细胞裂解液 (阳性对照)

人脐动脉平滑肌细胞 兔环0酸腺苷(cAMP)ELISA 试剂盒 Goat Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的羊抗大鼠IgG 0.1ml

B16-F10小鼠皮肤黑色素瘤细胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培养基+10%FBS 大鼠微管关联蛋白τ(MAPτ)ELISA试剂盒 TGF- Alpha(Human transforming growth factor Alpha)  人转化生长因子α 96T

Phospho-MKP1 (Ser318)： 0酸化原活化蛋白激酶0酸酶1抗体 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0239U-937(人组织细胞淋巴瘤细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠微管关联蛋白4(MAP4)ELISA试剂盒 N-AChR  大鼠型乙酰受体 48T96T

Metabotropic glutamate receptor 2： 促代谢型谷酸受体2抗体 tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);F9-CAG-tTA-3E5

PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞) 大鼠微管蛋白β3(TUBB3)ELISA试剂盒 ODF(Mouse osteoclast differentiation factor)  小鼠破骨细胞分化因子 96T

HNEPC人鼻粘膜上皮细胞Involucrin： 囊包蛋白/内披蛋白抗体 SCARB2 Others Mouse 小鼠 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠T淋巴细胞;Cl.Ly1+2-/9 人补体片段3c(C3c)ELISA 试剂盒 LH(Luteinizing Hormone) 促黄体生成素抗原 0.5mg

Insulin Receptor R： 胰岛素受体相关受体抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1002

OP9(小鼠骨髓基质细胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD8B / P37 / LEU2 人细胞裂解液 (阳性对照) 人补体片段3b受体(C3bR)ELISA 试剂盒 LH(Luteinizing Hormone) 人促黄体生成素(多肽) 0.5mg

INCA1： INCA1蛋白抗体 人脐带间充质干细胞HUMSC